الإختبار العملي للكشف عن نقص أو زيادة الحديد بالصباغة
- هو إختبار يستخدم للكشف عن وجود عنصر الحديد في الأنسجة بما في ذلك الكبد Liver والنخاع العظمي Bone Marrow وترسيب البول Urine sediment حيث يلاحظ نقص الحديد في بعض الأمراض من أهمها : مرض فقر الدم الناتج عن نقص الحديد Iron deficiency anaemia كما يلاحظ زيادة تركيز الحديد في الأنسجة في الأمراض التالية : أنيميا البحر الأبيض المتوسط Thalassemia نتيجة لنقل الدم المتكرر للمريض كذلك في حالة Hemochromatosis.
الخطوات العملية للصباغة
1- عمل فيلم من العينة التي تم سحبها من النخاع العظمي Bone marrow أو من ترسيب البول على شريحة زجاجية نظيفة وتترك لتجف .
2- نقوم بتثبيت الشريحة مستخدمين محلول الميثيلين تركيزه 97 % في حال كانت العينة مأخودة من نخاع العظم أو نثبتها في محلول الفورمالين الذي تركيزه 5 % في حال كانت العينة مأخوذة من الأنسجة.
3- نقوم بتحضير المحاليل المستخدمة في الصباغة كالتالي :
المحلول الأول هو عبارة عن K Ferrocyanide)) كمايلي :
- نوزن مستخدمين ميزان حساس مقدار 2.5 جرام من مادة الـK Ferrocyanide
- نقوم بوضعها في وعاء نظيف ثم نظيف لها 25 ملي من الماء المقطر Distilled water ونخلطهم .
المحلول الثاني هو عبارة عن حمض الكلورHCL)) كمايلي :
- نأخذ مقدار 5 ملي من حمض الكلور الذي تركيزه 37.5 % .
- نوضع الكمية السابقة من حمض الكلور في وعاء ونظيف لها 20 ملي من الماء المقطر ثم بعد ذلك يتم خلطهم.
4- الآن أصبح لدينا محلول 1 ومحلول 2 جاهزين للإستعمال.
5- نأخذ كمية متساوية من المحاليل السابقة ونضعها في وعاء مع بعض ونخلطهم ثم نضع الشريحة في هذا الخليط لمدة 30 دقيقة.
6- تصبغ الشريحة بعد ذلك بصبغة الصفرانيين safranin لمدة 3 دقائق وبالنسبة لنخاع العظم يتم صبغة بالصبغة المعاكسة وهي صبغة الهيماتوكسلين Haematoxylin .
7- تغسل الشريحة بالماء المقطر .
8- نترك الشريحة لتجف.
9- نقوم بفحص الشريحة بواسطة الميكروسكوب .
10- نلاحظ الحديد بالون الأزرق وبالتالي مع الخبرة يمكننا تحديد النقص والزيادة بإستخدام الصباغة.
الثلاثاء 5 أغسطس - 1:07
