زراعة العينات لتشخيص الفطريات

في هذا الموضوع سنتكلم إن شاء الله عن جزئين

الجزء الاول

انواع الميديا لزراعة العينة والوقت اللازم لحضن العينة

و درجة الحرارة اللازمة لحضن العينة

الجزء الثاني

طرق فحص المزرعة بعد الحضن

****************

الجزء الأول

أنواع الميديا اللازمة لزراعة الفطريات

بعد أن نكون فحصنا العينة ميكروسكوبيا نحتاج الى زراعة العينة من أجل عزلها

يفضل الانابيب في حالة زراعة الفطريات على الأطياق وذلك لأنها لن تجف مع الوقت الطويل في عملية الحضن

وكذلك لإعطاء فرصة للفطر الموجود فعلا في العينة للنمو والتقليل من التلوث في العينة بفطريات أخرى من الجو

الأطياق لا تستتخدم أبدا إذا توقعنا أن نجد Coccidioides immitisهذا الفطر خطر جدا ويمكن استنشاقه بسهولة

ودائما يجب أخذ احتياطات السلامة عند العمل

**************

Sabouraud dextrose agar SDA

هذا هو الميديا العام للزراعة ال PH=5.6 ولكنه فقير بالمواد الغذائية

هذه الظروف تعمل على منع اي بكتيريا من النمو ولكنها تيمح للملوثات من الفطريات

ولكنها لا تسمح بنمو ال Histoplasma capsulatum وبعض السلالات من ال Nocardia asteroides

المكونات

dextrose 40mg

Neopeptone 10mg

agar 15mg

distilled water 1 liter

التحضير

اخلط جميع المكونات وضعها على النار لتذوب

قسمها في انابيب او اطباق وضعها في التعقيم لمدة 10 دقائق

ضعها بوضع مائل واتركها لتبرد ثم ضعها في الثلاجة

طريقة الزراعة

أولااااااااااا ::ضع الانبوب ليأخذ درجة حرارة الغرفة

ثانيا:::أجزاء من العينة تؤخذ وتزرع في الاجار

ثالثا :::احضنها في الحاضنة لمدة شهر قبل ان تسجل ان النتيجة سلبية

Sabourd dextrose agar with
cycloheximide and chloramphenicol
SDS-C&C

السيكلو هيكسميد والكلورام فينيكول هما مضادان حيويان يمنعان نمو البكتيريا

ومعظم الملوثات من الفطريات وبالتالي يسمحان بنمو الفطريات الممرضة الموجودة بالعينة

يستعمل هذا الميديا لزراعة عينات الجلد الشعر الاظافر التي تنمو بهااو يتوقع وجود ال

Dermatophytesاو الcandida albicans

فهذه الميكروبات لا تمنع هذه المضادات من نموها فبالتالي تنمو عليه

المكونات

dextrose 40mg

neopeptone 10mg

agar 15mg

distilled water 1 liter

cyclohexamide 500mg

acetone 10ml

chloramphenicol 50mg

95% alcohol 10mg

التحضير

اخلط اول اربع مكونات مع بعضهما ثم

اذب السيكلوهسيدين في الاسيتون والكلورام فينكول في الكحول

اضف الاثنين الى الميديا واخلطهما جيداااااااااااااااااااااااا

قسم الميديا في انابيب وضعها في الاوتوكليف لمدة 10 دقائق

ثم بردهاااااااااااااااا وضعها في الثلاجة

العمل

اولااااااااااااا:::اترك الميديا تاخذ درجة حرارة الغرفة

ثانياااااااا:::::::اعمل مسحة داخل الاجار

ثالثااااااا::::: احضن العينة لمدة شهر قبل ان تسجل النتيجة سلبية

Brain heart infusion agar with blood BHIAB

هذا الميديا يحوي مواد غذائية جيدة واضافة الدم اليه تجعله غنيا بها اكثر

في وجود الاوكسجين البكتيريا والفطريات الممرضة والملوثة تنموجيدا عليه جميعها

واهذا فهو الى درجة محدودة غير مجدي بوجود الاوكسجين

لكن قيمته بوجود الاوكسجين تكمن في عزل ال Histoplasma capsulatum و ال Nocardia

من عينات معقمة جيدا وكذلك لتحويل الفطريات الDimorphic من فطر الى خميرة

يحضن الميديا في اجواء عديمة الاوكسجين اذا توقعنا وجود ال Actinomycetes

المكونات

brain heart infusion 37mg

distilled water 1 liter

agar 20mg

sheep blood defibrenated sterile 100mg

التحضير

اخلط جميع المكونات معااااااا الا الدم ضعها في الاوتوكليف لمدة 15 دقيقة

ثم بردها على درجة حرارة 50 مئوية

اثناء التفاف الاناء الموضوع فيه الميديا اضف الدم ثم صبه حالا داخل الاطباق او قسمه اجزاء في الانابيب

زراعة العينات لتشخيص الفطريات 339868

يتبع ان شاء الله

مشكوريييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييييين

:hii:

هذا الذي نسميه ابداع

زراعة العينات لتشخيص الفطريات 285400

thanks

شكرا للمعلومات المفيده. هل هناك اوساط بيئيه اخرى للفطريات غير هذه وممكن لو سمحت المراجع ولوفي باللغه الانجليزيه يكون افضل

» العينات المخففه و العينات المشبعه
» ملف عن الفطريات
» ملف عن العينات في المختبر
» صور عن الفطريات الطبية
» زراعة البول ( Urine Culture )