فحص التوافق لنقل الدم

يعتبر فحص التوافق من الفحوصات الهامة التي يجب أن تعمل قبل إعطاء الدم للمريض لمنع أي مضاعفات قد تحصل له وللتأكد من أن المريض سوف يستفيد من نقل الدم , مع العلم أن فحص التوافق لا يمنع بأي حال من الأحوال تكون أجسام مضادة ضد الانتيجينات الأخرى التي لا تفحص بصورة روتينية في فحص التوافق مثل K انتيجين و Fyaوغيرها.

فحص التوافق نوعان:

1- رئيسي Major حيث يتم خلط عينة من سيرم المريض مع كريات الدم الحمراء من كل وحدة من الوحدات التي سوف تحضر للمريض.

2- ثانوي Minor حيث يتم فيه إضافة كريات الدم من المريض إلى البلازما من كل وحدة دم تحضر للمريض.

النوع الثاني لا يعمل بصورة روتينية لكل مريض لأن الأجسام المضادة التي قد تكون موجودة في بلازما الوحدات للمتبرعين يتم تخفيفها ببلازما المريض وبالتالي تقليل أثرها , كما أنه تفادي وجود الأجسام المضادة في وحدات المتبرعين عن طريق عمل فحص روتيني للتحري عن وجود الأجسام المضادة Antibody Screen لجميع المتبرعين.

يلزم لعمل فحص التوافق عينة طازجة من سيرم المريض وكريات الدم الحمراء من المتبرع التي تخضع لعملية غسيل بالمحلول الملحي Saline ( على الأقل ثلاث مرات) ومن ثم يضاف إليها المحلول الملحي لتخفيفها لتصبح بنسبة 5% ولا يجوز استعمال كريات الدم الحمراء مباشرة بدون تخفيفها أو غسلها.

عملية الغسل بالمحلول الملحي تفيد في :-

1- إزالة مخلفات تحلل الدم Hemolysis حتى يتسنى اكتشاف وجود أجسام مضادة عند المريض تؤدي إلى تحلل (وليس تخثر) كريات الدم الحمراء مثل Anti-Le a و

Anti –Le b.

2- إزالة السيرم الذي قد يحتوي على مادة لويس Lewis substance (موجودة في حوالي 90%من المتبرعين) التي تتفاعل مع الأجسام المضادة الموجودة في سيرم المريض, وبالتالي إعطاء نتيجة سلبية غير حقيقيةFalse Negative Result .

خطوات فحص التوافق:-

عند تلقي طلب نقل الدم Blood Transfusion Request مرفقا بعينة المريض نقوم بعمل فصيلة الدم للمريض بطريقة الأنبوب Tube Method ومن ثم نختار وحدات الدم لنفس الفصيلة للمريض , ونحضر منها خلايا حمراء معلقة بنسبة 5% . يجب التأكد من فصيلة دم الوحدة قبل الشروع في عملية فحص التوافق.

1- خطوة المحلول الملحي Saline Phase = Immediate Spin

نقوم بخلط 4 نقاط من سيرم المريض مع نقطتين من محلول الخلايا المعلقة لكل وحدة دم في أنبوب خاص مسجل عليه رقم هذه الوحدة , ومن ثم نقوم بوضع الأنابيب في جهاز الطرد المركزي المسمى Serofuge الخاص ببنك الدم لمدة 15 ثانية على سرعة عالية ( 3000 دورة في الدقيقة). بعد ملاحظة عدم وجود تحلل لكريات الدم الحمراء نقوم بتحريك الأنبوب حركة بسيطة لإعادة خلط الخلايا مع السيرم وملاحظة وجود تخثر من عدمه. في حالة عدم وجود تخثر نكمل للخطوة الثانية.

هذه الخطوة مهمة جدا حيث تعتبر خطوة تأكيدية لفصيلة كل من دم المريض ودم الوحدة كما أنها مهمة للكشف عن وجود الأجسام المضادة التي تعمل على درجة حرارة الغرفة

(Cold Antibodies) مثل Anti- M ,Anti- P1 .



2- خطوة الحضانة على درجة حرارة 37 مئوية = خطوة الألبومين Albumin Phase :-

بعد قراءة النتيجة بعد الخطوة الأولى وعندما تكون النتيجة سلبية نضع على الأنبوب نقطتين من محلول الألبومين 22% Bovine Albumin . نقوم بوضعها في حمام ماء على درجة حرارة 37 مئوية أو حاضنة لمدة لا تقل عن 15 دقيقة.

هناك اختلاف على فترة الحضانة , فالبعض يضع الأنبوب في الحاضنة لمدة ساعة او نصف ساعة. لكن 15 دقيقة تعتبر مدة كافية للكشف عن وجود الأجسام المضادة التي تعتبر مهمة من الناحية السريرية والتي تعمل على درجة حرارة الجسم.

من الجدير ذكره انه يمكن تقليل فترة الحضانة لمدة 10 دقائق باستعمال محاليل خاصة تقلل من نسبة التنافر بين كريات الدم الحمراء( سالبة الشحنة) مثل محلول LISS .

الألبومين يعمل على تقارب كريات الدم الحمراء لبعضها مما يساعد أنواع معينة من الأجسام المضادة المعروفة ب IgG على تخثير كريات الدم الحمراء حيث أن طول IgG يبلغ 250 انجستروم وهذا الطول يعتبر قصيرا بالنسبة للأجسام المضادة IgM والتي يبلغ طولها 1000 انجستروم الذي يساعدها على تخثر كريات الدم الحمراء في المحلول الملحي.

هذه الخطوة مهمة لاكتشاف وجود الأجسام المضادة التي تتفاعل على درجة حرارة 37 مئوية والتي هي مهمة من الناحية السريرية مثل الأجسام المضادة ضد انتيجينات نظام العامل الرايزيسي( (Anti- c, Anti- C, Anti-E, Anti-e وكذلك لتفاعل الأجسام المضادة مع الأنتيجينات التي لا تحدث تخثر بل تحسس Sensitization والتي تظهر في الخطوة الأخيرة ((AHG Phase مثل Anti-S, Anti-K, Anti-Fya وغيرها.

3-خطوة كومبس Coomb's Phase = AHG = Anti –Human Globulin

هذه الخطوة لا غنى عنها في أي فحص توافق لأن معظم الأجسام المضادة المهمة من الناحية السريرية تكتشف في هذه الخطوة.

بعد قراءة النتيجة في خطوة الألبومين نقوم بغسل الخلايا بالمحلول الملحي على الأقل ثلاث مرات , نقلب الأنبوب على ورق نشاف لفترة وجيزة حتى نتخلص من المحلول الملحي المتبقي في الأنبوب , بعدها نضيف سيرم الأجسام المضادة AHG ونضعها في جهاز الطرد المركزي الخاص ببنك الدم Serofuge لمدة 15 ثانية , نحرك الأنبوب حركة بسيطة لإعادة خلط الخلايا ثم نقرأ النتيجة باستعمال المجهر على قوة تكبير 10 .

بعد قراءة نتيجة الخطوة الأخيرة وفي حالة أن تكون النتيجة سلبية نقوم بإضافة خلايا كومبس التأكيدية Coomb's Check Cells ( وهي عبارة عن خلايا O محسسة Sensitized بالأجسام المضادة Anti-D التي يجب أن تعطي تخثر (نتيجة ايجابية) , هذا يعني أن محلول AHG قد أضيف وأن غسل الخلايا قد تم على ما يرام لكن ذلك لا يعني ان فحص التوافق قد عمل على الشكل المطلوب.

في حالة إعطاء خلايا كومبس التأكيدية نتيجة سلبية فهذا يعني أن فحص التوافق غير صحيح Invalid وفي هذه الحالة يجب إعادة فحص التوافق مرة أخرى للتأكد من صحة النتيجة السلبية لفحص التوافق ( وأن دم المتبرع موافق لدم المريض) واصطلاح الخطأ الذي يكمن في :-

1- أن عملية غسل الخلايا في المرحلة الأخيرة غير كافية , وبالتالي فان بقايا السيرم أدت إلى إبطال مفعول محلول AHG .

2- أن محلول AHG لم يضف إلى الأنبوب أصلا.

3- أن محلول AHG لا يعمل أصلا قبل إضافته إلى الخلايا.



حساسية فحص التوافق تعتمد على العوامل التالية :-

1- قوة الأنتجين Strength of Antigen على كريات الدم الحمراء.

2- هل العينة طازجة أم لا.

3- هل الخلايا معاملة بالأنزيم أم لا.

4- نسبة الأنتجن إلى الأجسام المضادة.

5- درجة الحرارة وفترة الحضانة.

excellent subject and very clear

د. موز
شكرا جزيلا لك

لا أستطيع أن أقول إلا أنه موضوع مميز

اخي الكريم أشكرك على المعلومة ولكن أرجو إضافة طريقة تصالب الدم عبر الهلام
وكيفية العمل بها وشكرا

شكرا الك
شرح كثير واضح

شكرررررررررررررررا جزيلا